Останнім часом широко обговорюється потенційна роль синтезованих рекомбінантних поліпептидів в дерматології і дерматокосметології. Завдяки розвитку біотехнологічних способів їх отримання стало можливим високоякісне виробництво цих сполук.
При цьому провідні компанії, що пропонують споживачам косметичні препарати на основі рекомбінантних поліпептидів, постійно відстежують їх якість і вплив на шкіру.
На базі Інституту геронтології імені Д.Ф. Чеботарьова НАМН України пройшло дослідження, як впливає на шкіру sh-Oligopeptide-72 (Wharton Jelly Peptide Р199), який використовується в препаратах ABG Lab (США), які представляє ЕМЕТ ™. Результатами дослідження компанія поділилася з читачами .
Чому об'єктом наукового дослідження став поліпептид sh-Oligopeptide-72
Підвищена увага до рекомбінантним пептидів пов'язано з тим, що ці з'єднання не ксеногенні, не несуть інфекційної небезпеки і можуть проводиться в великих кількостях. Особливий інтерес представляють пептиди, характерні для тканин пупкового канатика - органу, багатого стовбуровими клітинами і поліпептидами здатними ініціювати їх активність.
З'єднання sh-Oligopeptide-72 (Wharton Jelly Peptide Р199) є синтетичним аналогом поліпептиду, широко представленого в тканини пупкового канатика людини. Це з'єднання поліпептидного природи і розглядається як стимулятор ділення і диференціації стовбурових клітин мезенхимальной сполучної тканини зокрема епідермісу і дерми.
Науковий інтерес до поліпептид sh-Oligopeptide-72 пов'язаний з тим, що є дані про його вплив на вікові зміни шкіри. Тому метою дослідження стало вивчення можливостей з'єднання, що входить до складу препаратів, представлених Емет ™, в стимулюванні процесів оновлення клітинних структур дерми і епідермісу при введенні препарату в шкіру ін'єкційним шляхом.
Як проходило наукове дослідження впливу поліпептидів на шкіру
Метою наукового дослідження, яке проводилося на базі Інституту геронтології імені Д.Ф. Чеботарьова НАМН України (Київ) стало вивчення впливу поліпептиду sh-Oligopeptide-72 (Wharton Jelly Peptide Р199) на фібробласти і на мезенхімальні стовбурові клітини шкіри (МСК).
Для отримання МСК провели аспірацію жирової тканини з внутрішньої поверхні стегон у донорів-добровольців віком 40 років. Жир належним чином перемішали з буфером для відмивання, центрифугировали. Отриману стромально-васкулярної фракцію культивували в повній середовищі (ДМЕМ, збагачена 10% фетальної бичачої сироваткою) при 100% вологості і температурі 37 ° С, з 5% СО2. Після проходження трьох пасажів і стабілізації куль тури клітини використовували для випробувань.
Результати дослідження впливу поліпептиду на фібробласти і МСК
Всі досліджувані концентрації поліпептиду P199 (від 1 до 1000 нг / мл) не приводили до змін метаболічної та проліферативної активності зрілих фібробластів. Середні значення поглинання розчину формазану, напрацьованого клітинами в середовищі при різних концентраціях поліпептиду P199, відповідають середнім значенням даного показника в контрольній групі (рис. 1).
Зрілі фібробласти дерми не чутливі до поліпептид Р199. Чи не виявлено стимулюючого або пригнічувала впливу всіх вивчених концентрацій. На підставі цього поліпептид можна вважати нетоксичним для фібробластів дерми.
В результаті дослідження виявлено стимулюючу дію поліпептиду P199 в певних концентраціях на МСК людини. Концентрація від 0,5 мкг / мл до 2 нг / мл не має вираженого впливу. Метаболічна активність клітин при впливі препарату в даних концентраціях була близька до контрольної (рис. 2). При цьому препарат в концентраціях 1-2 нг / мл стимулював метаболічну активність стовбурових клітин.
В експериментах не виявлено підвищення міграційної активності зрілих фібробластів після впливу на них поліпептиду P199. На відміну від фібробластів МСК, які інкубували з полипептидом P199, виявили набагато більш високу міграційну активність в тесті «загоєння рани» (рис. 3): за 18 год - 68,5%, за 28 год - майже повне заростання.
Сам факт потужної стимуляції міграції вже при низькій концентрації 10 нг / мл поліпептиду Р199 в середовищі свідчать про специфічний вплив поліпептиду P199 на міграційну активність МСК шкіри.
Проведене дослідження показало специфічність впливу поліпептиду P199 на рухову і метаболічну активність МСК, а також відсутність значущого впливу досліджуваних концентрацій на фібробласти шкіри.
Ефекти мезотерапевтичних препаратів, що містять поліпептид P199, можна пояснити саме впливом речовини на міграційну активність МСК, які рекрутуються з глибоких шарів підшкірного підстави або дерми і, ймовірно, диференціюючи в фібробласти, відновлюють виснажений клітинний пул, а потім ремоделирующих матриксного складову, синтезуючи колаген різних типів , еластин і глікозаміноглікани. Відсутність стимулюючого ефекту препарату на зрілі фібробласти може бути викликано його нездатністю активізувати процеси мітохондріального дихання.
Таким чином, на підставі проведеного дослідження впливу поліпептиду sh-Oligopeptide-72 (Wharton Jelly Peptide Р199), що міститься в препаратах, представлених Емет ™, на фібробласти і на мезенхімальні стовбурові клітини шкіри (МСК), вчені прийшли до наступних висновків.
Фібробласти дерми дорослої людини не чутливі до різних концентрацій Wharton Jelly Peptide Р199. Речовина в діапазоні концентрацій 1-1000 нг / мл не проявляє ні токсичного, ні стимулюючого ефектів на диференційовані фібробласти.
МСК дерми людини чутливі до поліпептид P199. Препарат в концентрації 1-2 нг / мл стимулює метаболічну активність МСК.
Wharton Jelly Peptide Р199 ™ стимулює міграційну активність МСК дерми, але не її зрілих фібробластів.