Діагностика інфекційних захворювань - бактеріальних і вірусних - спрямована на раннє виявлення збудників, що дозволяє призначати ранню і максимально ефективну терапію. Найсучаснішим способом діагностики інфекцій є ПЛР або полімеразна ланцюгова реакція. Так що ж це за метод, і для чого він потрібен?
Суть полімеразної реакції
Будь-мікроорганізм і вірус містять у своїй структурі молекули ДНК або РНК. У кожного з них ці сполуки унікальні, тому, якщо виділити в аналізі крові у дітей або дорослих нуклеїнові кислоти, можна з абсолютною точністю поставити діагноз.
На жаль, концентрація ДНК в зразках крові або інших біологічних матеріалах досить низька і за допомогою звичайних методів діагностики визначити її не виходить. Щоб впоратися з цією проблемою, була винайдена полімеразна ланцюгова реакція.
Сутність ПЛР полягає в спеціальній обробці зразка крові, в результаті чого в ній збільшується концентрація ДНК молекул, визначення типу яких в подальшому дозволяє встановити вид збудника і поставити діагноз.
Як здати кров на ПЦР
При підготовці до аналізу слід дотримуватися загальних рекомендацій: не пити і не їсти безпосередньо перед аналізом крові. Хоча для здачі крові на ПЛР можна так строго не дотримуватися цих вимог, так як точність дослідження не залежить від того, на ситий або голодний шлунок був узятий аналіз.
Які захворювання можна виявити за допомогою ПЛР
За допомогою ПЛР можна виявити практично будь-які вірусні та бактеріальні захворювання. Для аналізу використовується не тільки кров, а й інші біологічні матеріали: сперма, слина, мазки з уретри і з шийки матки. Аналіз крові буде інформативний в тому випадку, якщо збудник конкретного захворювання проникає в кров людини. Тому ПЛР крові призначають при таких захворюваннях:
- вірусні гепатити А, В, С, D і TT;
- цитомегаловірус;
- герпетична інфекція (віруси герпесу 1, 2 і 4-го типів);
- Віч інфекція
- ентеровірусна інфекція;
- оперізуючий лишай;
- краснуха;
- токсоплазмоз;
- інфекційний мононуклеоз;
- лістеріоз.
Якщо ж взяти до уваги можливість проведення ПЛР інших біоматеріалів, то в список захворювань, що виявляються за допомогою ПЛР, слід додати:
- гарднерельоз;
- сальмонельоз;
- дифтерія;
- туберкульоз;
- папіломавірусну інфекцію (близько 100 різних штамів вірусу папіломи людини);
- трихомоніаз;
- мікоплазмоз.
Особливо актуально в даний час ПЛР аналізу крові вагітної на так звані TORCH-інфекції: цитомегаловірус, токсоплазмоз, краснуху та герпесвірусної інфекції. Пов'язано це з тим, що згадані захворювання можуть привести до аномалій розвитку плода.
переваги ПЛР
100% точність діагностики - якщо в крові є навіть кілька фрагментів ДНК збудника, за допомогою ПЛР вони буду виявлені, і буде поставлений точний діагноз. Це головна відмінність даного методу від інших способів діагностики - ІФА, загального аналізу крові та інших.- Специфічність. При проведенні ПЛР відсутнє таке поняття, як псевдопозитивний або помилково негативні результати. На відміну від імуноферментного аналізу (ІФА).
- Можливість проведення аналізу відразу на кілька збудників з одного зразка біоматеріалу, що робить метод зручним для пацієнта - не потрібно кілька разів здавати аналіз.
- Швидкість. Не потрібно виділяти і вирощувати збудника на живильних середовищах, як це робиться при бактеріологічному дослідженні. Результат може бути готовий вже в день здачі аналізу.
- За допомогою ПЛР виявляють збудників латентних захворювань, коли збудник в організмі є, але він ще не викликав захворювання, або коли пацієнт є носієм інфекції (гепатиту або ВІЛ).
- Низька вартість. Ціна аналізу ПЛР на одного збудника становить 250-500 рублів. Трохи дорожче коштує Напівкількісний аналіз на віруси - близько 1000 рублів.
100% точність діагностики - якщо в крові є навіть кілька фрагментів ДНК збудника, за допомогою ПЛР вони буду виявлені, і буде поставлений точний діагноз. Це головна відмінність даного методу від інших способів діагностики - ІФА, загального аналізу крові та інших.недоліки аналізу
ПЛР є високотехнологічним методом дослідженням і пред'являє високі вимоги до оснащення лабораторії. Приміщення, де роблять аналіз, обов'язково повинно бути оснащено фільтром біологічного очищення, так як в повітрі постійно присутні частинки шкіри, слини, що містять в своєму складі молекули ДНК. Недотримання техніки роботи з біоматеріалами може стати причиною неправильного результату.
Аналіз крові - розшифровка у дорослих (ПЛР)
Трактування результатів цього дослідження не представляє складнощів, тому що відсутня таблиця норм аналізу крові на ПЛР. У бланку результатів можуть фігурувати лише дві фрази:
- негативний результат - збудник, на який проводився аналіз, не виявлене;
- позитивний результат - в організмі є збудник зазначеного захворювання.
Слід знати, що ПЛР може бути позитивною навіть при відсутності клінічних симптомів захворювання! Розшифровка аналізу крові на ПЛР у дітей не відрізняється від такої у дорослих.
Кому потрібно здати аналіз на ПЛР
Будь-яка людина може здати кров для дослідження. Прямим показанням для дослідження є підозра на інфекції що передаються статевим шляхом (хламідіоз, гарднерельоз, ВІЛ-інфекція). При випадковому незахищений статевому контакті лише ПЛР допоможе поставити діагноз на ранній стадії, якщо людина заразилася будь-яким захворюванням. В обов'язковому порядку кров на TORCH-комплекс здають вагітні жінки. А також жінки, тільки планують вагітність.
Хоча ПЛР є максимально ефективним методом діагностики, зациклюватися тільки на ньому не варто. Обстеження пацієнта при будь-якому захворювань повинно носити комплексний підхід. Якщо ланцюгова полімеразна реакція дозволяє виявити збудника, то серологічне дослідження дозволяє оцінити ефективність лікування, реакцію організму на збудника і ліки. Призначати все дослідження повинен лікар за показаннями.
Побачити, як виконується аналіз крові ПЛР, ви зможете, переглянувши даний відео-огляд:
Гудков Роман, лікар-реаніматолог